以下是關(guān)于鏈霉親和素（SA）修飾150nm金納米顆粒的詳細(xì)說明，涵蓋制備、特性及應(yīng)用：

1. 基本特性

• 金納米顆粒（AuNPs）核心：

• 尺寸：150nm（可通過動態(tài)光散射DLS或透射電鏡TEM驗(yàn)證）。

• 表面等離子共振（SPR）：在可見光區(qū)（約520-600nm）有強(qiáng)吸收，可用于比色檢測。

• 穩(wěn)定性：需表面修飾（如SA）防止聚集，SA提供負(fù)電荷增強(qiáng)膠體穩(wěn)定性。

• 鏈霉親和素（SA）修飾：

• 結(jié)合位點(diǎn)：每個(gè)SA可結(jié)合4個(gè)生物素分子，實(shí)現(xiàn)高密度生物分子偶聯(lián)。

• 偶聯(lián)方式：通常通過靜電吸附或共價(jià)連接（如羧基-氨基交聯(lián)）將SA固定在AuNPs表面。

2. 制備方法

步驟示例：

1. AuNPs合成：

• 檸檬酸鈉還原法（適用于小尺寸）：需調(diào)整方法（如種子生長法）制備150nm AuNPs。

• 表征：UV-Vis光譜（SPR峰紅移）、TEM（確認(rèn)單分散性）。

2. SA修飾：

• 活化AuNPs：用帶羧基的 linker（如11-巰基十一烷酸，MUA）修飾AuNPs，EDC/NHS活化羧基。

• SA偶聯(lián)：將SA與活化后的AuNPs孵育（pH 7.4 PBS緩沖液，室溫2小時(shí)）。

• 封閉：加入BSA或乙醇胺封閉未結(jié)合位點(diǎn)。

3. 純化：

• 離心（如10,000rpm, 15分鐘）去除游離SA，重懸于緩沖液（如含0.1% BSA的PBS）。

3. 關(guān)鍵質(zhì)量控制

• 結(jié)合效率：

• BCA法：測定上清液中未結(jié)合的SA濃度。

• SDS-PAGE：驗(yàn)證SA是否成功偶聯(lián)。

• 功能性測試：

• 加入生物素化熒光分子（如FITC-生物素），通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測信號。

4. 應(yīng)用方向

• 免疫檢測：

• 側(cè)向?qū)游?/span>：作為信號放大標(biāo)簽，檢測生物素化抗體（如新冠病毒抗原檢測）。

• ELISA替代：SA-AuNPs增強(qiáng)比色信號，提升靈敏度。

• 分子診斷：

• DNA檢測：結(jié)合生物素化探針，用于核酸雜交（如SARS-CoV-2 RNA檢測）。

• 細(xì)胞標(biāo)記：

• 靶向標(biāo)記細(xì)胞表面生物素化受體。

• 藥物遞送：

• 裝載生物素化藥物，實(shí)現(xiàn)靶向釋放（需優(yōu)化尺寸以穿透血管屏障）。

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