鏈霉親和素修飾PBS微球，PBS Particles-Streptavidin的介紹
2025-09-22
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鏈霉親和素修飾PBS微球（通常指聚苯乙烯微球）是一種結(jié)合了鏈霉親和素高親和性與聚苯乙烯微球物理穩(wěn)定性的功能化材料，廣泛應(yīng)用于生物檢測、免疫分析、分子診斷及細(xì)胞分選等領(lǐng)域。
一、核心特性
高親和力結(jié)合
鏈霉親和素（Streptavidin）與生物素（Biotin）的結(jié)合力較強(qiáng)（Kd≈10?1? M），且不受pH、溫度等因素干擾。這種特性使修飾后的微球能特異性捕獲生物素標(biāo)記的分子（如抗體、核酸、蛋白質(zhì)），實現(xiàn)高靈敏度檢測。物理穩(wěn)定性
聚苯乙烯（PS）微球具有良好的機(jī)械強(qiáng)度、化學(xué)穩(wěn)定性和生物相容性，表面光滑且均一性高，粒徑可控（通常100 nm–10 µm），滿足不同實驗需求。表面功能化
微球表面可修飾羧基（-COOH）、氨基（-NH?）等官能團(tuán)，通過化學(xué)交聯(lián)（如EDC/NHS活化）將鏈霉親和素穩(wěn)定偶聯(lián)于微球表面，保持其四聚體結(jié)構(gòu)與生物素結(jié)合能力。多功能衍生化
除鏈霉親和素外，微球表面還可共修飾熒光染料、磁性顆?；蛴H水分子，用于改善分散性、降低非特異吸附或增強(qiáng)信號讀出能力。
二、制備方法
微球合成
通過乳液聚合或懸浮聚合制備聚苯乙烯微球，控制粒徑和表面特性（如羧基化處理）。表面活化
使用EDC/NHS等試劑活化微球表面羧基，形成活性酯中間體，為鏈霉親和素偶聯(lián)提供反應(yīng)位點。鏈霉親和素偶聯(lián)
將高純度鏈霉親和素溶液與活化微球混合，室溫反應(yīng)2小時，通過共價鍵固定于微球表面。封閉與純化
加入BSA或甘氨酸封閉未結(jié)合位點，減少非特異性吸附；通過離心或透析去除游離鏈霉親和素，保存于4°C PBS緩沖液中。
三、應(yīng)用領(lǐng)域
免疫分析
ELISA改進(jìn)：將鏈霉親和素修飾微球與生物素標(biāo)記抗體結(jié)合，用于檢測抗原，顯著提高靈敏度。
側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)（LFA）：作為標(biāo)記物，實現(xiàn)快速診斷（如病原體檢測）。
分子診斷
核酸分析：結(jié)合生物素化探針，實現(xiàn)PCR產(chǎn)物捕獲、基因序列檢測，適用于病原體檢測和基因突變分析。
微陣列芯片：作為探針固定載體，用于高通量基因表達(dá)分析。
細(xì)胞分選與成像
流式細(xì)胞術(shù)：通過熒光信號和鏈霉親和素-生物素特異性結(jié)合，實現(xiàn)高精度細(xì)胞分選（如CD19+ CAR-T細(xì)胞分選純度>90%）。
熒光顯微成像：標(biāo)記細(xì)胞表面抗原，觀察細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)及分子分布。
生物分離與純化
親和層析：將鏈霉親和素固定于基質(zhì)上，與生物素標(biāo)記的目標(biāo)分子結(jié)合，實現(xiàn)特異性分離。
磁分離：結(jié)合磁性顆粒，通過磁場快速分離目標(biāo)分子，提高分離效率。
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