Sulfo-NHS-LC-Desthiobiotin 是一種重要的生物素衍生物，在生物偶聯(lián)和親和純化等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。以下是關(guān)于它的詳細(xì)介紹：
基本信息
結(jié)構(gòu)式：
化學(xué)結(jié)構(gòu)：其結(jié)構(gòu)中含有磺酰基（Sulfo-）、N - 羥基琥珀酰亞胺酯（NHS-）和脫硫生物素（Desthiobiotin）部分。磺酰基使其具有良好的水溶性，NHS 酯可與氨基反應(yīng)，脫硫生物素則能與鏈霉親和素等親和素特異性結(jié)合。
理化性質(zhì)：通常為白色固體，密度約為 1.41g/cm3，酸度系數(shù)（pKa）約為 - 0.04，可溶于大部分有機(jī)溶劑，如 DCM、DMF、DMSO 等，在水中也有很好的溶解性。
作用機(jī)制：Sulfo-NHS-LC-Desthiobiotin 中的 NHS 酯基團(tuán)能與生物分子（如蛋白質(zhì)、抗體、肽等）表面的氨基發(fā)生反應(yīng)，形成穩(wěn)定的酰胺鍵，從而將脫硫生物素標(biāo)記到這些分子上。標(biāo)記后的分子可利用脫硫生物素與鏈霉親和素的高親和力結(jié)合特性，進(jìn)行后續(xù)的分離、純化和檢測。
主要應(yīng)用
蛋白質(zhì)標(biāo)記與純化：通過與蛋白質(zhì)的伯胺基團(tuán)共價(jià)結(jié)合，標(biāo)記后的蛋白質(zhì)可通過鏈霉親和素樹脂捕獲，再利用生物素競爭性洗脫，溫和地將蛋白質(zhì)從樹脂上分離下來，避免 harsh 條件損傷蛋白。
細(xì)胞表面標(biāo)記：用于標(biāo)記細(xì)胞膜蛋白時(shí)，長鏈間隔臂（LC）可減少空間阻礙，增強(qiáng)標(biāo)記效率，適用于活細(xì)胞研究，后續(xù)可裂解 Desthiobiotin - 鏈霉親和素相互作用進(jìn)行分離。
相互作用研究：在 pull-down 實(shí)驗(yàn)中，將其偶聯(lián)到誘餌蛋白上，可捕獲與之結(jié)合的蛋白伴侶，用低 pH 或生物素溶液洗脫，能保留蛋白的天然構(gòu)象，便于研究蛋白質(zhì)之間的相互作用。
使用注意事項(xiàng)：應(yīng)密封避光，儲(chǔ)存于 - 20℃以下、陰涼干燥通風(fēng)處，避免頻繁解凍，現(xiàn)配現(xiàn)用。同時(shí)，要避免與含胺試劑（如 Tris、NaN?）等一起使用，以免干擾反應(yīng)，并注意優(yōu)化標(biāo)記比例，減少多標(biāo)記導(dǎo)致的蛋白聚集。
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2025-11-17
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