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如何確定熒光染料的激發波長/發射波長?

2023-05-25 [406]

如何確定熒光染料的激發波長/發射波長?

熒光光譜分為:激發光譜(PLE)和發射光譜(PL)。

激發光譜:固定發射光的波長,改變激發光的波長,記錄熒光強度隨激發波長的變化。發射光譜:固定激發光的波長,記錄不同發射波長處熒光強度隨發射波長的變化。

無論是激發還是發射熒光光譜圖,其都是記錄發射熒光強度隨波長的變化。所以熒光光譜中縱坐標為強度,橫坐標為波長。首先從圖中能獲取峰位和半峰寬。峰位的直觀體現是熒光的顏色;半峰寬則表示熒光的純度。

因此可以根據這種熒光素的激發譜線來確定其激發波長,根據其發射譜來確定其發射波長。

激發譜:不同波長的光激發熒光素后,熒光強度的變化。

發射譜:同一波長的光激發熒光素后,各波長下的熒光強度的變化。

一般都取峰值。

其發射波長會隨激發波長變嗎?

對不同材料來說不同,絕大多數情況下,發射波長會隨著激發波長的偏移而有所偏移。 對于固態物質,主要是因為分子與其它材料形成了π建,對于量子點溶液,激發波長也會顯著導致發射光譜的不同。 但是不是絕對的,比如對于Alex555分子,發射波長的偏移往往就相對較小,這是由于分子內部的能帶結構所決定的。


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