二氧化鈦磁珠的用途有哪些呢
2025-11-05
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二氧化鈦磁珠（1μm）是一種專(zhuān)有的磁性材料微粒載體，其核心用途集中在磷酸化肽富集和外泌體分離兩大領(lǐng)域，具體應(yīng)用場(chǎng)景及優(yōu)勢(shì)如下：
一、磷酸化肽富集：蛋白質(zhì)組學(xué)研究的關(guān)鍵工具
作用機(jī)制
二氧化鈦（TiO?）對(duì)磷酸絲氨酸（pSer）、磷酸蘇氨酸（pThr）和磷酸酪氨酸（pTyr）殘基具有選擇性親和力，能高效富集復(fù)雜生物樣品（如細(xì)胞裂解液、組織提取物）中的磷酸化肽。其表面納米粒子對(duì)單磷酸化肽和多磷酸化肽無(wú)偏好，適合單步富集用于質(zhì)譜分析。操作優(yōu)勢(shì)
高特異性：與磷酸化肽的親和力遠(yuǎn)高于非磷酸化肽，減少背景干擾。
高重復(fù)性：磁珠表面結(jié)構(gòu)均一，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致性。
快速磁響應(yīng)：磁響應(yīng)時(shí)間＜30秒，減少樣品損失，適配自動(dòng)化操作。
化學(xué)兼容性：厚殼層磁珠耐受強(qiáng)酸、強(qiáng)堿，適用于化學(xué)環(huán)境。
典型流程
平衡磁珠：用上樣緩沖液（如1M羥基乙酸、80%乙腈、5%三氟yi酸，pH 2.5-3.0）洗滌磁珠。
結(jié)合目標(biāo)肽：將消化后的蛋白樣品與磁珠混合，室溫孵育20-30分鐘。
洗滌去除非特異性結(jié)合：用洗滌緩沖液（如80%乙腈、1%三氟yi酸）清洗磁珠。
洗脫與收集：用洗脫緩沖液（如1%氫氧化銨）洗脫磷酸化肽，酸化后進(jìn)行質(zhì)譜分析。
應(yīng)用案例
基礎(chǔ)研究：從細(xì)胞裂解液中富集磷酸化肽，揭示磷酸化修飾位點(diǎn)及動(dòng)態(tài)變化。
臨床研究：分析疾病樣本中的磷酸化蛋白標(biāo)志物。
二、外泌體分離：疾病診斷與生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)的新方法
作用機(jī)制
TiO?磁珠通過(guò)與外泌體磷脂雙分子層的磷酸基形成雙齒結(jié)構(gòu)，特異性捕獲外泌體；磁性內(nèi)核支持快速分離，堿性溶液洗脫后可回收完整外泌體。操作優(yōu)勢(shì)
高回收率：從100mL血漿中提取約10?個(gè)外泌體，回收率達(dá)80%。
高純度：白蛋白等污染物含量顯著低于超速離心法。
快速分離：整個(gè)過(guò)程＜20分鐘，遠(yuǎn)快于傳統(tǒng)超速離心法（8-10小時(shí)）。
結(jié)構(gòu)完整性：洗脫的外泌體可直接用于下游分析（如透射電鏡、蛋白質(zhì)印記）。
典型流程
結(jié)合外泌體：將血漿樣本與磁珠混合，室溫孵育使磁珠捕獲外泌體。
磁分離：用磁分離器去除未結(jié)合成分，保留磁珠-外泌體復(fù)合物。
洗脫與收集：用堿性溶液洗脫外泌體，中和后進(jìn)行下游分析。
三、其他潛在應(yīng)用
糖肽富集：TiO?對(duì)糖基化殘基的親和力使其可用于糖肽選擇性富集。
核酸提取：部分磁珠通過(guò)表面修飾實(shí)現(xiàn)核酸高通量、自動(dòng)化提取。
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