蛋白G磁珠和蛋白A磁珠有什么不同
2025-11-05
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蛋白G磁珠和蛋白A磁珠在結合抗體能力、結合抗體種類及實驗應用效果上存在顯著差異,具體如下:
結合抗體的能力
蛋白G磁珠:蛋白G不僅能與IgG的Fc端結合,還能以較低親和力與Fab端特異性結合。這使得蛋白G磁珠在結合抗體時具有更廣泛的結合位點,從而提高了結合效率和穩定性。
蛋白A磁珠:蛋白A主要與IgG的Fc端特異性結合,其結合位點相對單一。雖然蛋白A磁珠在結合某些特定物種的IgG時表現出色,但在結合其他物種或IgG亞型時可能效果不佳。
結合抗體的種類
蛋白G磁珠:蛋白G磁珠能結合多種不同物種來源的抗體,包括小鼠、人、兔、母牛、山羊和綿羊等。這使得蛋白G磁珠在多種實驗場景中具有更廣泛的適用性。
蛋白A磁珠:蛋白A磁珠主要結合來自兔、豬、狗和貓等物種的IgG。雖然蛋白A磁珠在結合這些物種的IgG時表現出色,但在結合其他物種或IgG亞型時可能受到限制。
實驗應用效果
蛋白G磁珠:
抗體純化:蛋白G磁珠能高效地從血清、細胞培養物上清液或腹水中純化IgG抗體,且純度較高。
免疫沉淀(IP)和免疫共沉淀(Co-IP):蛋白G磁珠在IP和Co-IP實驗中表現出色,能高效地捕獲目標抗原及其相互作用伙伴,且背景信號較低。
染色質免疫沉淀(ChIP):蛋白G磁珠也可用于ChIP實驗,研究蛋白質與DNA的相互作用。
蛋白A磁珠:
抗體純化:蛋白A磁珠同樣能用于抗體純化,且在某些特定物種的IgG純化中表現出色。
免疫沉淀(IP)和免疫共沉淀(Co-IP):蛋白A磁珠在IP和Co-IP實驗中也能捕獲目標抗原,但其適用范圍可能受到抗體物種和亞型的限制。
染色質免疫沉淀(ChIP):蛋白A磁珠也可用于ChIP實驗,但同樣受到抗體結合能力的限制。
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