辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記3-硝基-L-酪氨酸

辣根過(guò)氧化物酶（Horseradish Peroxidase，HRP）是臨床檢驗(yàn)試劑中的常用酶，它不但廣泛用于多個(gè)生化檢測(cè)項(xiàng)目，也廣泛運(yùn)用于免疫類(lèi)（ELISA）試劑盒。而3-硝基-L-酪氨酸（3-Nitro-L-tyrosine）則是一種化學(xué)物質(zhì)，其外觀為黃色至綠色粉末。關(guān)于辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記3-硝基-L-酪氨酸這一組合，具體介紹如下：

一、HRP標(biāo)記3-硝基酪氨酸（3-NT-HRP）

該制品是以3-硝基酪氨酸（3-NT）與辣根過(guò)氧化物酶（HRP）經(jīng)化學(xué)交聯(lián)獲得的標(biāo)記物。它可溶于PBS（pH7.4）中，蛋白濃度≥1mg/ml，并含有BSA及甘油等酶穩(wěn)定劑。此標(biāo)記物可作為標(biāo)記物用于抗體的制備，或用于3-硝基酪氨酸及其抗體的檢測(cè)。經(jīng)稀釋后，它還可用于ELISA檢測(cè)，效價(jià)≥1:5000。

二、蛋白質(zhì)酪氨酸硝化

定義：蛋白質(zhì)硝化（Protein Nitration）是一種重要的蛋白質(zhì)翻譯后的選擇性修飾，一般是指蛋白質(zhì)酪氨酸殘基硝化成3-硝基酪氨酸（3-Nitrotyrosine，3-NT）。

影響：蛋白質(zhì)酪氨酸硝化（Protein Tyrosine Nitration）可以導(dǎo)致一些酶的失活，影響酪氨酸磷酸化調(diào)節(jié)的信號(hào)傳導(dǎo)，還可以通過(guò)改變細(xì)胞的細(xì)微結(jié)構(gòu)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。

與疾病的關(guān)系：蛋白質(zhì)酪氨酸的硝化可能參與許多疾病的發(fā)生和發(fā)展。

體內(nèi)途徑：

一種是活性氮（Reactive Nitrogen Species，RNS）如ONOO-等介導(dǎo)的。

另一種是含卟啉過(guò)氧化物酶催化亞硝酸鹽氧化生成的。

生物檢測(cè)標(biāo)志：病理情況下，體內(nèi)產(chǎn)生的活性氧（O2-、HO-、H2O2、ONOO-等）和活性氮（NO-、NO2-、N2O3等），除了直接造成氧化損傷外，還可與蛋白質(zhì)酪氨酸殘基或游離酪氨酸反應(yīng)發(fā)生硝化，生成穩(wěn)定的代謝產(chǎn)物3-NT。正常人體血漿酪氨酸濃度大約為100mmol/L，這不僅為體內(nèi)酪氨酸的硝基化提供了可能，也使其產(chǎn)物3-NT成為了組織和細(xì)胞損傷的一個(gè)生物檢測(cè)標(biāo)志。3-NT比較穩(wěn)定，作為檢測(cè)組織和細(xì)胞氧化損傷的一個(gè)生物標(biāo)志已受到廣泛關(guān)注。

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