鏈霉親和素修飾磁珠100nm是一種結合了磁性納米材料與鏈霉親和素高親和力特性的功能化微球,直徑約為100納米,在生物分離、靶向純化、分子檢測及細胞捕獲等領域展現出廣泛應用前景。
一、核心特性
高親和力結合
鏈霉親和素(SA)與生物素(Biotin)的結合常數高達,形成極穩定的非共價復合物,幾乎不可逆。這種特性使磁珠能高效捕獲生物素標記的抗體、蛋白質、核酸探針等分子,實現目標分子的選擇性分離和純化。
大比表面積
100nm的粒徑賦予磁珠極大的比表面積,增強與生物分子的接觸效率和結合容量。例如,每毫克磁珠可結合游離生物素超過2900 pmol,生物素化單鏈寡核苷酸超過420 pmol,生物素化IgG超過21μg。
超順磁性
以超順磁性納米顆粒(如四氧化三鐵)為核心,在外加磁場作用下可快速分離和洗滌,顯著提升實驗效率和準確性。磁感應距離大,用普通磁鐵即可輕松實現對磁珠的富集與轉移。
低非特異性吸附
表面經過特殊工藝修飾(如BSA封閉),減少非特異性吸附,提高分離純度。例如,Sera-Mag鏈霉親和素磁珠的非特異性結合更低,適用于質譜分析等高靈敏度檢測。
良好分散性與流動性
便于在液相環境中均勻分布和快速響應磁場,適合微量樣品的高靈敏度分離及復雜體系中的精準操作。
二、應用場景
生物分離與純化
蛋白質純化:通過生物素化抗體或配體,特異性捕獲目標蛋白。例如,利用鏈霉親和素磁珠從混合體系中沉淀分離特定蛋白質,適用于無法與Protein A/G結合的抗體。
核酸提取:結合生物素標記的核酸探針,實現DNA/RNA的高效分離。例如,在靶向測序中富集特定基因區域,提高檢測靈敏度。
外泌體捕獲:通過生物素化抗體特異性結合外泌體表面標志物,實現外泌體的分離和檢測。
細胞分離與富集
利用生物素化抗體標記細胞表面抗原,通過磁珠間接捕獲目標細胞群。例如,在腫瘤細胞分離、免疫細胞分選中,鏈霉親和素磁珠可高效分離特定細胞亞群,廣泛應用于臨床分析。
免疫檢測與生物傳感
化學發光/熒光免疫檢測:作為固相載體,結合生物素化抗體構建檢測體系,捕獲樣本中目標物質。例如,在ELISA或免疫層析中,鏈霉親和素磁珠可簡化操作流程,提高檢測靈敏度。
生物傳感器:利用鏈霉親和素與生物素的高親和力,檢測生物分子的相互作用。例如,在磁共振成像(MRI)中,四氧化三鐵核心可作為造影劑,提高成像對比度和分辨率。
高通量篩選與質譜分析
適用于快速篩選生物活性分子,如藥物篩選或酶活性檢測。由于非特異性結合低,鏈霉親和素磁珠可用于蛋白質組學樣品制備和檢測開發,如Pull-down實驗。
靶向藥物遞送
作為藥物載體,通過生物素-鏈霉親和素系統實現靶向遞送。例如,將藥物或基因治療分子負載于磁珠表面,通過磁場引導至特定組織或細胞,減少全身毒性。
三、使用注意事項
儲存條件
需密封保存于2-8℃或-20℃(避免冷凍),長期保存建議使用含1% BSA的硼酸緩沖液,以防止磁珠團聚或降解。
操作規范
使用前應充分混勻(超聲或手動搖勻),避免磁珠沉降。建議使用高質量移液器吸頭和反應管,減少磁珠粘附損失。
生物素化分子的加入量應為磁珠載量的1-2倍,以確保磁珠飽和結合。例如,每毫克磁珠可結合生物素化IgG 21μg,需根據實驗需求調整用量。
安全警示
僅限科研使用,不可用于人體臨床診斷或治療。實驗過程中需遵守生物安全規范,避免直接接觸磁珠溶液。
鏈霉親和素修飾磁珠100nm
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